Ποιο είναι το αντιβιογράφημα;
Το αντιβιογράφημα είναι μια μικροβιολογική δοκιμασία που χρησιμοποιείται για τη δοκιμή της ευαισθησίας ενός μικροοργανισμού σε ένα ή περισσότερα αντιμικροβιακά φάρμακα.
Χρησιμοποιείται κυρίως σε επίπεδο υγιεινής, το αντιβιογράφημα διεξάγεται παραδοσιακά σε δείγματα βακτηριακών αποικιών που προέρχονται από μονάδες που λαμβάνονται με φάρυγγα, ουρηθρικό, ορθικό ή κολπικό επίχρισμα ή απομονώνονται από δείγματα περιττωμάτων, ούρων ή πτυέλων.
Εκτελεστικές τεχνικές και αντίσταση στα αντιβιοτικά
Το αντιβιογράφημα συχνά εκτελείται με τη μέθοδο διάχυσης άγαρ, που επίσης αναφέρεται ως τεχνική Kirby-Bauer.
Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας, ένα βακτηριακό δείγμα λαμβάνεται από τις αποικίες και σπέρνεται (κατάλληλα τοποθετημένο) στο κατάλληλο έδαφος, όπου διανέμονται επίσης δίσκοι εμποτισμένοι με αντιβιοτικά σε γνωστές συγκεντρώσεις (υπαγορευμένες από θεραπευτικές ανάγκες). Η πλάκα τοποθετείται έπειτα σε έναν επωαστήρα και μετά από μια προκαθορισμένη χρονική περίοδο (π.χ. 18 ώρες στους 35 ° C) είναι δυνατόν να εκτιμηθεί μια σχετικά ομοιόμορφη μικροβιακή ανάπτυξη, με περισσότερο ή λιγότερο μεγάλους αλογόνους γύρω από τις άκρες χαρτιού. Με βάση την έκταση αυτών των περιοχών αναστολής, εκτιμάται η ευαισθησία του βακτηριδίου σε κάθε μεμονωμένο αντιβιοτικό που εξετάστηκε: εάν η διάμετρος είναι μεγάλη, ο μικροοργανισμός είναι ευαίσθητος στο φάρμακο (S), ενώ εάν είναι μικρό το βακτήριο έχει ενδιάμεση ευαισθησία (I ή MS), ενώ αν τα βακτηριακά είδη που εξετάστηκαν είναι αμελητέα ή και απουσιάζουν, είναι ανθεκτικά (R) στο φαρμακευτικό προϊόν. Για να προσδιοριστεί με ακρίβεια η βακτηριακή ευαισθησία, μετράται η διάμετρος των αλογόνων αναστολής σε mm, συγκρίνοντας τις τιμές που λαμβάνονται με τις πρότυπες τιμές για το βακτηριακό στέλεχος.
Πώς να αποτρέψετε την αντίσταση στα αντιβιοτικά
Τα αντιβιοτικά ΔΕΝ είναι αποτελεσματικά κατά των ιών. Οι τυπικές ιογενείς λοιμώξεις είναι τα κρυολογήματα, η γρίπη, η λαρυγγίτιδα, η βρογχίτιδα, η κρούστα και οι πιο πονόλαιοι λαιμοί (φαρυγγίτιδα).
Η χρήση αντιβιοτικών όταν δεν χρειάζονται (για παράδειγμα για κρυολογήματα ή γρίπη) μπορεί να οδηγήσει στην ανάπτυξη αντοχής στα αντιβιοτικά (τα βακτήρια είναι "ανθεκτικά στα αντιβιοτικά" όταν δεν μπορούν να σκοτωθούν από το αντιβιοτικό).
ΣΗΜΕΙΩΣΤΕ: είναι το βακτήριο που είναι ανθεκτικό στο αντιβιοτικό, ΟΧΙ το άτομο. Επομένως, ακόμη και αν δεν έχετε χρησιμοποιήσει ποτέ αντιβιοτικά, μπορείτε να αναπτύξετε λοιμώξεις που προκαλούνται από ανθεκτικά στα αντιβιοτικά βακτήρια.
Για να αποφευχθεί η εμφάνιση αντοχής στα αντιβιοτικά, είναι απαραίτητο να ολοκληρωθεί η θεραπεία που έχει συνταγογραφηθεί από το γιατρό. ακόμα και αν αισθάνεται καλά να σταματήσει πρόωρα τα αντιβιοτικά.
Όταν κατά τη διάρκεια του αντιβιογράμματος τα άλατα των γειτονικών δίσκων συγχωνεύονται, τα εν λόγω αντιβιοτικά θεωρούνται συνεργικά.
Ως εναλλακτική λύση στη μέθοδο που μόλις περιγράφηκε, το αντιβιογράφημα μπορεί επίσης να πραγματοποιηθεί σε υγρό μέσο, αξιολογώντας - μετά την επώαση - την θολερότητα που αντιστοιχεί σε διαφορετικούς βαθμούς αραίωσης φαρμάκου (βλ. Παρακάτω).
Το αντιβιογράφημα έγινε τώρα μια βασική δοκιμασία, δεδομένης της διαδεδομένης διάδοσης του φαινομένου ανθεκτικότητας σε φάρμακα. Η επιλογή του λάθους αντιβιοτικού ή η χρήση φαρμάκου ευρείας φάσης για την αποφυγή αυτής της διαδικασίας μπορεί στην πραγματικότητα να επιλέξει τα βακτηριακά στελέχη που είναι ανθεκτικά στη δράση του. Στο άρθρο που αφιερώνεται σε αυτό το θέμα, έχουμε δει πώς αυτή η χωρητικότητα αρχικά αποκτήθηκε για αυθόρμητες μεταλλάξεις και στη συνέχεια μεταδόθηκε σε άλλα βακτήρια. Συνεπώς, δεν είναι τυχαίο ότι η ανακάλυψη και η κλινική χρήση πολλών αντιβιοτικών έχει συμβαδίσει με την εμφάνιση βακτηρίων ανθεκτικών στη δράση τους. Βλάβη, πολύ συχνά, μιας ακατάλληλης και υπερβολικής χρήσης αυτών των φαρμάκων, για παράδειγμα για τη θεραπεία ιογενών λοιμώξεων κατά των οποίων αποδείχθηκαν εντελώς άχρηστες (η μόνη δυνατή δικαιολογία είναι να αποφευχθούν οποιεσδήποτε βακτηριακές επιμολύνσεις σε άτομα που βρίσκονται σε κίνδυνο).
Δύο πολύ σημαντικές παράμετροι που προέρχονται από το αντιβιογράφημα είναι το MIC και το MBC:
- MIC (ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση, ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση): είναι η χαμηλότερη συγκέντρωση της εξεταζόμενης ένωσης που είναι απαραίτητη για την αναστολή της ανάπτυξης ενός δεδομένου μικροοργανισμού.
- MBC (Ελάχιστη Βακτηριακή Συγκέντρωση): είναι η χαμηλότερη συγκέντρωση της εξεταζόμενης ένωσης που απαιτείται για να προκαλέσει το θάνατο άνω του 99, 9% ενός συγκεκριμένου μικροβιακού πληθυσμού.
Για να εκτιμηθεί το MIC σε στερεά μέσα με αντιβιογράφημα, υποτίθεται ότι ο μικροβιακός παράγοντας διαχέεται από το δίσκο στο άγαρ δημιουργώντας μια βαθμίδα συγκέντρωσης. Κατά συνέπεια, όσο πιο μακριά από το δίσκο τόσο χαμηλότερη είναι η συγκέντρωση του φαρμάκου, η οποία μειώνεται προοδευτικά για να φθάσει στην κρίσιμη συγκέντρωση (ελάχιστη προσέγγιση MIC αναστολής συγκέντρωσης). Πέρα από αυτό το σημείο υπάρχει συγκλίνουσα ανάπτυξη, ενώ στην περιοχή που βρίσκεται πλησιέστερα στον δίσκο η ανάπτυξη απουσιάζει.
Στο αντιβιογράγραμμα σε υγρό μέσο, παρασκευάζονται μια σειρά δοκιμαστικών σωλήνων που περιέχουν το μέσο καλλιέργειας και βαθμονομούνται αραιώσεις (σε αναλογία 2) του προς έλεγχο αντιβιοτικού. Σε κάθε ένα από αυτά τα σωληνάρια εμβολιάζεται μια τυποποιημένη ποσότητα των υπό εξέταση μικροβίων. ακολουθεί την επώαση και την εξέταση του ίδιου. Όπως αναμενόταν, παρουσία θολερότητας, η βακτηριακή ανάπτυξη είναι ορατή, ενώ ένα διάλυμα παρέμεινε διαυγές δηλώνει πλήρη αναστολή της μικροβιακής ανάπτυξης, υπογραμμίζοντας την βέλτιστη αποτελεσματικότητα του φαρμάκου. Στην περίπτωση αυτή, η MIC (ελάχιστη ανασταλτική συγκέντρωση) αντιπροσωπεύει την υψηλότερη αραίωση (δηλαδή τη χαμηλότερη συγκέντρωση) αντιβιοτικού ικανή να αναστείλει πλήρως την ανάπτυξη του μικροοργανισμού. Η MBC (ελάχιστη βακτηριοκτόνος συγκέντρωση) δημιουργείται αντιθέτως αυξάνοντας τα δείγματα που λαμβάνονται από το υγρό μέσο σε ένα ειδικό στερεό μέσο και αξιολογώντας την πιθανή ανάπτυξη βακτηριδίων. Συνεπώς, το MIC θα αντιστοιχεί στη συγκέντρωση του αντιβιοτικού που υπάρχει στον σωλήνα, όπου το φάρμακο είναι περισσότερο αραιωμένο και το οποίο κατά την πολιτιστική εξέταση δεν παρουσιάζει σημεία βακτηριακής δραστηριότητας (βλ. Εικόνα).
Τα αποτελέσματα του αντιβιογράμματος δημοσιεύονται σε μια ειδική έκθεση, όπου αναφέρονται τα χρησιμοποιούμενα αντιβιοτικά και οι σχετικές MMC. μερικές φορές αναφέρονται οι συνδυασμοί αντιβιοτικών που μπορούν να χρησιμοποιηθούν και ο βαθμός αντοχής των μικροοργανισμών.
Οι παραδοσιακές μέθοδοι για την εκτέλεση του αντιβιογράμματος, πολύ χρήσιμες για εκπαιδευτικούς σκοπούς, εξελίσσονται συνεχώς. Σήμερα, για παράδειγμα, είναι διαθέσιμα αυτοματοποιημένα εμπορικά συστήματα, ενώ τα μαξιλαράκια χαρτιού μπορούν να αντικατασταθούν από λωρίδες που περιέχουν αυξημένες δόσεις αντιβιοτικού, κατάλληλα δεικνυόμενες στην ίδια την ταινία (Ε-δοκιμασία αντιβιογράμματος).
